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什么工具检测精子液精液检查

     精液指男性在达到性高潮后通过射精的方式从尿道中排出体外的液体。正常精液是一种黏稠的液体混合物,由精子和精浆组成,其中精子占10%以下,其余为精浆。精子是由睾丸产生,通过附睾成熟、输精管输出。精浆主要成分为前列腺液、尿道球腺分泌的尿道球腺液、精囊腺分泌的精囊液组成的混合液,还包括少量睾丸液、附睾液等。精浆中含有含有大量水、果糖、蛋白质和脂肪外,还含有多种酶类、无机盐和微量元素,为精子提供能量和营养物质。

前列腺可分泌前列腺液,前列腺液是精液重要的组成部分,其提供精子生存的营养物质并参与精液的凝固与液化过程。前列腺液可碱化精液以对抗女性阴道中的酸性环境,提高精子的生存率和活动力。前列腺内还含有5α-还原酶,可将睾酮(雄激素)转化为更有生理活性的双氢睾酮。

精子受到多种激素调节,并由睾丸、附睾等性腺产生贮存。精子的成熟生长周期需要90天左右。

精子影响因素

包括物理因素(温度、电磁辐射、高频振动等)、化学因素(DEHP增塑剂、多氯联苯153等)、生活方式(紧身裤、久坐少动、吸烟、大量饮酒等)、感染因素、微量元素摄入不足、疾病因素、药物因素(环磷酰胺、秋水仙碱等)。而某些男性由于从事的职业长期暴露于高危因素,从而导致精液质量较正常人群明显降低。其中包括有:

1. IT和工程技术人员,由于长期久坐憋尿伤精,辐射引发精子染色体畸变;

2. 化工行业工作人员,主要原因是由于化工产品污染物影响精子质量;

3. 长途司机,由于长期久坐影响局部血液循环,常并发前列腺炎,影响精液质量;

4. 厨师,由于长期局部阴囊温度升高,影响睾丸生精功能以及杀死成熟活精子;

5.炼铁、石油开采工人,除了长期高温工作环境外,还需要接触化学废弃物。

6. 其他高危职业,包括长期熬夜、应酬、生活作息紊乱的相关从业人员。

精液理学检查

将盛有完整的精液标本的容器置于37℃环境,待精液液化,30~60min,评估并记录精液外观、精液量、黏稠度、液化时间、酸碱度、精子活力、精子数量、精子存活率、精子形态学、混合抗球蛋白反应试验、过氧化物酶试验、免疫珠试验或间接免疫珠试验、附属性腺标志物、病原微生物学检测等。

1.精液外观:正常精液外观呈均质性、灰白色或乳白色,不透明。精液呈棕色或红色,提示红细胞存在,称血精,考虑可能有精囊腺炎、前列腺炎等生殖系统疾病。黄色见于黄疸患者和服用维生素或药物者。长时间未排精的人射出的精液略带淡黄色。老年男子精液呈暗黄色。精液出现黄绿色,则表示男性生殖道或副性腺存在炎症可能。若存在大量白细胞,精液明显混浊、透明度降低。当精子密度很低时,精液近乎透明。

2.精液量:推荐称重法测量精液量,在接收到标本5min内完成。将收集标本的广口瓶预称重(重量标在瓶身和瓶盖上),直接将标本留取到改良的广口瓶后进行称重,减去瓶子重量,以1.01g/ml的精液浓度计算精液量。不推荐使用移液管、注射器和量筒测量精液体积。正常一次射精量约为1.5~6.8 ml,平均3.5ml。如果受检者3天不排精液,1次射精总量仍少于1.5ml,则为精液量少,容易导致不育。如果多于8ml则为过多,可以是禁欲时间较长,或者是附属腺体亢进以及炎症引起,这时候不但精子密度变低,还容易从女性阴道中流出,致使精子总数降低,常见于精囊炎患者。精液量过多过少均容易导致不育。

3.黏稠度:精液完全液化后,使用Pausteur滴管法或玻棒法,观察拉丝长度。正常精液形成不连续的小滴,拉丝长度小于2cm,黏稠度异常或液体增厚时,拉丝长度大于2cm。根据液化和拉丝程度将精液黏稠度分为3级:1级,30min基本液化,呈黏稠丝状;2级,60min不液化,呈粗大黏稠丝;3级24h不液化,黏稠性很高呈胶冻状。

4.液化时间:精液离体收集到容器后,通常在室温或37℃孵育箱内几分钟内开始液化,在15~30min内完全液化,可进行后续检查。超过30 min不液化,应在37℃孵育继续放置30min,即60min后进行后续检查。超过60min仍不能液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。

5.酸碱度:应在精液液化后测量,宜在30mir后进行。推荐使用测量范围为6.0~10.0的pH试纸来测定酸碱度。正常精液pH为7.2~8.0(平均为7.8),呈弱碱性。pH<7.0并伴有精液量减少和精子数量减少,可能存在先天性双侧输精管缺如和胚胎因素,精囊腺缺失或发育不良也可造成精液量减少和pH降低。pH>8.0,见于前列腺、精囊腺、尿道球腺和附睾的炎症。

精液显微镜检查

精液显微镜检查,或称精液有形成分分析,包括精子活动率、精子活动力、精子计数、精子形态分析和精子凝集现象检查及其他有形成分检查等,需采用标准化的操作和计数方能获得准确和可靠的结果。

1.精子活动率

精子活动率是活动精子占精子总数的百分率。射精30~60min内精子活动率达到80%~90%。活动率<40%,应进行精子活体染色,检查精子的存活率。常用检测方法为伊红-苯胺黑染色法和低渗肿胀试验来鉴别细胞膜完整的精子,鉴别不动死精子和不动活精子,大量活而不动精子提示精子尾部结构缺陷:大量死精子提示附睾存在疾病或感染所致免疫反应。总精子数25%~30%为活而不动精子,提示为遗传性纤毛问题。

2.精子活动力

精子活动力是评估男性生育能力的重要指标。WHO将精子活动力分为4级:a级:精子快速前向运动(精子速度>25μm/s);b级:缓慢前向性运动(精子速度5-25μm/s);c级:非前向运动(精子速度<5μm/s):d级:不活动精子。正常标本采集后60min内,50%的精子呈中度或快速直线运动。前向运动度(PR)就等于快速前向性和缓慢前向性精子之和,总运动度等于前向运动精子(PR)加上非前向运动精子(NP)。前向运动(a+b)精子少于50%,或快速前向运动(a)精子少于25%,称弱精子症(asthenospermia)。

3.精子计数

精子计数包括精子密度和精子总数。精液中精子浓度与受精率和妊娠率相关,精子总数>39 × 106/射精考虑为正常,减低或增高均可引起不育。当精子密度< 20×106/ml或一次排精总数<10×107为少精子症。 精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后,连续检查无精子,说明手术成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。 

4.精子形态分析

精子形态分析采用计算机技术客观的评价精子头部长度、宽度、周长和面积,只有头、颈、中段和尾部都正常的精子才能称为正常精子。一般正常形态精子数量大于30%。正常精子头部成椭圆形,长度4.0~5.0μm,宽度2.5~3.5μm,顶体界限清楚,占头部40%~70%;中段细,长度6~8μm,宽度不超过1μm;尾部长度至少45μm,细长无卷曲。头部出现巨大头、无定形、双头等;体部出现粗大、折裂、不完整等;尾部出现卷尾、双尾、断裂,均可判定为异常精子。简单的形态学评价将精子分为正常和异常两类。若进行全面详细形态学评价,可将精子分为5类:正常、头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷、胞质小滴(位于精子中段,该区域大于正常精子头部的1/3)。

5.精液气味

正常精液具有刺激性气味,有时类似栗子花或石榴花的特殊腥味,精液的这种气味是由前列腺液产生的。当前列腺分泌功能受损时,精液会缺乏这种腥臭味。

WHO人类精液分析手册第五-第六版比较

精液化学检验

中性α-葡萄糖苷酶

中性α-葡萄糖苷酶对附睾疾病的诊断具有更高的特异性和敏感性。精液中α-葡萄糖苷酶有两种亚型(中性和酸性),其中,中性亚型占比较大主要来自于附睾;酸性亚型占比较小,主要来自前列腺液。利用十二烷基硫酸钠可选择性抑制酸性 a-葡萄糖苷酶活性,从而测定精浆中中性a-葡萄糖苷酶的活性,特异性地反映附睾分泌功能。中性 a-葡萄糖苷酶的参考值为每次射精>23.1 mU/L。

白细胞介素

男性生殖道慢性炎症是导致不育症发生的重要原因。生殖道感染或炎症患者的精液的主要特征是白细胞数量超过1x106/ml和黏度增加,而最常见的临床症状是慢性骨盆疼痛。生殖道感染或炎症可通过炎性细胞产生炎性介质或氧自由基改变生殖道微环境破坏精子,从而损伤生育能力。多种细胞,包括单核细胞、激活的T淋巴细胞和中性粒细胞可产生炎症趋化因子,协同或加成作用于靶细胞。精浆中IL-8水平同时具有较好的准确性和敏感性,是男性生殖道感染或炎症最好的诊断指标。

特异性抗体

精子出现凝集时需进行精子抗体检测。精浆中的抗精子抗体主要由IgA和IgG2种类型构成。免疫球蛋白M由于其相对分子质量较大,主要在急性时相感染中起作用,在精浆中鲜有发现。与IgG抗体比较而言,IgA临床意义更大。而95%以上携带IgA抗精子抗体的患者,其IgG也为阳性。2种类型抗体均可在针对精子细胞或生物体液的相关筛查试验中发现。精子抗体会严重影响精子功能,通常以精子-黏液穿透实验进行评估。抗精子抗体可以影响透明带结合试验和顶体反应,也会损害精子穿透宫颈黏液的能力。

精子DNA完整性检测

精子DNA完整性(DFI),即精子DNA碎片指数,DNA碎片率或DNA完整性,是指发生DNA链断裂成单链的DNA碎片的精子占全部精子的百分比。 

精子DNA碎片化可由多种生理过程引发,包括精子生发过程中DNA组装缺陷,和多种病理因素与环境相关的细胞死亡和氧化应激。虽然包含精子DNA碎片的精子受孕能力不受影响,但DNA碎片指数会影响着床和胚胎发育及妊娠结局。

 DFI是反映精子质量的重要指标。 DFI≤15%,精子DNA完整性良好;15%≤DFI≦25% ,精子DNA完整性中等;DFI25%精子DNA完整性差


精液检查化学指标

备注:精浆锌为前列腺分泌功能的标志物,精浆果糖为精囊腺分泌功能的标志物

今日小贴士

取精流程

1、采集精液前应严格禁欲2~7天(无性交、无手淫、无遗精)。如果需要多次采集标本,每次禁欲天数均应尽可能一致。


2、采集精液标本的次数:由于精液分析检查时受到多种因素影响:如环境,温度等,所以可间隔1~2周、重复检查2~3次。如近期有发热等影响精液检查的因素,就在3个月复查。


3、采集精液的方法过程:采集前,采精者应尽量排尿,并用肥皂清洗双手和阴茎,减少来自皮肤微生物导致精液标本污染的风险。  


采集方法:手淫法;取精器(电按摩法);性交中断法;前列腺按摩。一般情况下,采集者采用手淫法采集标本,如果遇到手淫采集有困难也可使用正规的清洁的取精器采集,如电动取精器。而性交中断法是不可靠的精液采集方法,因为性交采集精液有可能会失去精液的初始部分,而在这一部分精液中,精子密度很高。


4、存储精液的容器:使用医护交由的清洁的容器,也可使用专用的避孕套,但是普通的乳胶避孕套不能用于精液采集,因为它含有滑石粉等可能损害精子活力的物质。

    

5、转送精液标本:无论在医院还是在家采集精液,都应尽量在采集后的30 min内将标本送至实验室。在运送至实验室期间,标本尽量保持在20~37℃。冬季转送标本时,可将标本放进内穿衣口袋内,但要注意防止管子倒置溢漏。


6、精液标本也是可能含有危险的传染性病原体,例如人类免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒或者单纯疱疹病毒等,故精液和相关使用过的器材应按潜在生物危害物进行处理。

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