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查凝血应用什么仪器APTT纠正试验结果常用判定方法临界值建立及诊断效能评价

1.1.1 一般资料

回顾性分析2019年3月至2021年10月就诊于中国医科大学附属第一医院不明原因APTT延长并进行APTT纠正试验,且明确APTT延长原因的116例患者的资料。其中,抑制物阳性71例,因子缺乏45例;抑制物阳性包括LA阳性61例,FⅧ抑制物阳性9例,FⅤ抑制物阳性1例;因子缺乏包括vWD2例,FⅫ缺乏10例,FⅪ缺乏3例,FⅨ缺乏4例,FⅧ缺乏13例,FⅤ缺乏2例,FⅡ缺乏1例,同时也收集了使用华法林导致多因子缺乏标本10例。男42例,女74例,中位年龄43.5 (1~78) 岁。通过凝血因子检测明确所缺乏凝血因子及其水平,通过稀释蝰蛇毒凝血时间试验和硅凝固时间试验检测LA,且检测至少间隔12周,LA阳性≥2次,最终确认为LA阳性标本。通过Bethesda方法检测凝血因子抑制物。排除使用肝素、直接凝血酶抑制剂的标本。同时排除分析前误差,如肝素污染、标本送达延迟、EDTA污染、标本凝固、溶血、标本量不足等。

1.1.2 仪器与试剂

应用STA-R EVOLUTION凝血分析仪进行APTT相关所有检测,所用试剂为STA®-PTT A。试剂1含有兔脑磷脂和硅土(激活物) 的冻干粉,试剂2为0.025 mol/L CaCl2。应用ACL TOP-750凝血分析仪及配套试剂进行LA检测。

1.1.3 NPP的制备

选取健康体检者的3.2%枸橼酸钠抗凝血20份,男女比例相等,年龄18~55岁,常规凝血试验结果正常,避免选择感染、肿瘤、创伤、妊娠、新生儿等人群标本;确保每个单独血浆标本血小板计数 < 10×109/L;将收集标本混合后,以1 500 g离心15 min2次;排除LA阳性。

1.2.1 即刻APTT纠正试验操作方法

将等量的患者血浆与NPP混合后,将患者血浆、NPP和混合后血浆立即装载至凝血分析仪进行检测,所得APTT分别为PAPTT、NAPTT、MAPTT。

1.2.2 即刻APTT纠正试验结果的不同判定方法

(1) 目前最常用的方法是循环抗凝剂指数[也称为罗斯纳指数(Rosner index,RI)],RI (%) = [(MAPTT-NAPTT) /PAPTT]×100;(2) 百分比纠正法,纠正百分比(%) = [(PAPTT-MAPTT) / (PAPTT-NAPTT)]×100;(3) 正常参考范围法,MAPTT结果不超过APTT正常参考范围上限,本实验室建立本地APTT正常参考范围上限为43 s;(4) 差值法,即MAPTT与NAPTT的差值。

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