1、第一部分 仪器的使用目的及工作原理一、 使用目的 全自动血凝仪STAGO Compact主要有于凝血、抗凝、纤溶系统的功能检测，为术前凝血功能检查、出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓与抗凝治疗的监测与疗效观察提供有价值的指标。二、 检测原理1、概述STA Compact 是由STAGO公司生产的，用于试管检验的全自动实验室设备。可用凝固法、发色底物法和免疫法进行血浆样品测试。 性能特点： 1）多种测试及分析：凝固时间，发色底物法，免疫法。2）存放及运转环境；+15-+35摄氏度，相对湿度2080%，避免阳光直射在打开的抽屉上。3）样品管理系统：每个抽屉放置96个离心过的试管，其中包括直径
2、11mm（3ml），直径11.6mm13.4mm（5ml）,长度65-100mm，可自动位置识别及条形码读入。 4）试剂管理系统：共有45个试剂位置，并配备不同直径，可自动位置识别及条形码读入，并恒温在1519摄氏度，可对试剂有效期及剂量自动控制。 5）加样管理：以钨卤灯为光源，凝固法通过电磁感应，检测介质粘度变化，发色底物法，和免疫法 405nm和540nm单色光测吸收度 O.D.（02.50O.D.之间）。 6）加样量5-200ul 7）检测杯预置1000个带不锈钢球的检测杯盘，检测杯最大容量400 ul，最小容量凝固法：150 ul，光学法：250 ul。 2工作原理 21凝固法 STA
3、 Compact 的检测是在被测血浆粘度不断增加的基础上进行的。通过不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动，检测出血浆粘度的增加。检测杯两侧独立的线圈产生相反的电磁场，驱动钢球运动。电磁场的能量由测试项目决定（如纤维蛋白原使用弱场，而其它检测使用正常磁场强度。）如果血浆浓度没有变化，钢球也将以匀速运动下去。一旦被检测血浆开始凝固（加入激活试剂），血浆粘度增加，改变了钢球的运动，使其减慢，并且振幅减小，此振幅的变化由数学算法通计算机得到凝固时间。 22光学法 STA Compact光学检测的原理为光吸收法，使用两种波长的单色光405nm和540nm，通过反应杯内的光学变化进行检测。 光吸收的原理：入
4、射光（lo）进入反应杯后,被反应物吸收.测出透射光(l+lp),A=log(l1/l0)(注log以10为底) 干扰散身光lp,被另一相同的只检测散射光的参比值相减而排除。 l1=l=lp(初测值,包括入射光和散射光) l2=lp(参比测量,挡住入射光,只测散射光) 从l1减去l2即为l.只是入射光lp作为测量之间的参比常数。 入射光由钨卤灯提供，由光栅选择单色波长（405nm或540nm），该过程在光学模块中进行。由一束光纤将单色光传送到检测部位，另一束光纤携透射光到光学测量电路。 Beer-Lambert定律将吸光度转变为浓度。 A=IC A=吸光度 =分子消散系数 I=光路长度 C=浓度
5、 发色浓度与吸光度成正比关系（注所有光密度是由测量光纤同参比光纤比较的结果）第二部分 质量控制一、检测前的质量控制1、室内质量控制 (IQC) 室内质量控制的目的：室内质量控制用来确定在一段时间内一系列的技术和方法所得出的结果是否始终保持一致。质量控制（QC）通常用于描述所建立的检测方法是否足够可靠，以协助临床对止血异常性疾病的判断、治疗、监测及诊断。质量控制程序可确保操作和检验结果始终处于控制之中。 2、质量控制材料 质控品的使用：为了评估特定技术的精确性，有必要重复分析分装的相同标本。质控品应包括正常和异常二种水平，以确保特定分析物在不同水平均处被控之中。因为在一个操作过程中相对小的变化在
6、测定异常情况时，可能会非常明显。质控物的来源：质控物的性质应和检测标本相似，并在相同时间测定。人体来源的质控物和人体检测标本更加接近。所有瓶装或分装的质控品应是完全一样的，这样就不会因为瓶与瓶的差异造成结果的差异。质控物在有效期内应该是稳定的。 质控物的保存：为保证止血试验及其测试的准确性，干粉质控品应在2-8内保存；干粉质控品复溶分装后，应在-20以下保存，复溶冰冻质控品，应在37oC，5-10分钟快速融化。具体操作：复溶制控品时，先将移液管用蒸馏水冲洗干净，用无菌注射用水进行复溶， 上机前充分混匀,质控通过后，将余下质控品放入-20冰箱以下保存，冰冻质控品从冰箱取出后，在37oC，5-10
7、分钟快速融化，充分混匀，然后上机。质控方法：每天都应做正常和异常质控。 质控品必须和检测标本同样处理。生理、技术、分析等因素可能造成差异，故每一次QC结果应记录并对可接受性进行评估。 结果差异的可接受范围 IQC参考范围的建立：商品化的IQC标本制造商经常会提供一个可接受的参考范围，在筛查试验的测定中，所得结果将取决于试剂和所用的检测系统。参考范围必须考虑到这些因素。若某特殊检测项目无参考范围，则实验室需自己建立。建立方法：当已知某方法在控（已提示质控品在质控范围内），则每天应重复进行室内质控品测定（至少10次），然后计算出质控结果的平均值和标准差（SD）。标准差是d2和除以n-1所得商的算术
8、平方根，d是指各结果同均数之间的差值，n是测定数。SD表示结果的离散情况，SD越大，结果离散程度越大。 另外一个重要的参数是变异系数(CV)，是标准差与平均数商的百分比， (CV = SD/mean×100%) 。每天PT、APTT质控品检测值，其CV应小于5。根据惯例，为IQC结果设定的参考范围为X±2SD，这包含了95的可信区间。每次结果应记录在案，以此来确定参考范围。结果判断：所有以后的检测结果如果在这个范围之内就认为可接受。在范围之外说明这个质控品已经变质、质控品未被正确处理或该方法未在控。另取质控品重复检测可区分上述可能：如结果继续在范围之外，说明检测系统失控，质
9、控品检测结果中长期漂移（如设备或者试剂的损坏或变化导致）可通过记录表格很容易发现。质控的测定操作程序：在主屏幕下，选择Calib/control中的Quality control，进入质控界面，用光标键移动选择需要运行质控的项目，用F1选中些项目，此时该项目在左面应标“S”，如果不能选中，填写缺少参数，然后再回到质控屏幕，用F10键运行该项目。、2）质控程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的试验项目，用ENTER进入统计范图菜单，在此菜单下可观察正常或异常质控数据。如果此项质控数失控，分析失控原因，作出相应处理，可用ESC键，并选择“重新运行”该项目，质控在控方可进行检测。二.标本采集 使用3.
10、8%或3.2%(W/V)拘橼酸钠溶液作为抗凝剂；血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数，按比例重抽血检验；血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；采样后60分钟内进行；分离血浆应在3500r/min 离心10分钟，务使血小板去除；盛血浆容器应加塞，防止PH改变；血浆存放时间不能太久：温度有效时间室温2hr284hr-202Weeks-706months低温保存的样品，要在37迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。影响检测结果因素的了解及不合格标本的
11、拒收：患者进行凝血功能检查前准备不能忽视，凝血功能检查首先要了解患者是否接受肝素、口服抗凝药和抗血小板药物治疗，是否主为重型肝炎病人。这要求临床送检医生在检验申请单上注明相关信息；检验医生应该熟悉了解各方面影响因素，并多与临床多沟通。对不合格标本，主要做到以下几方面：1、 标本与检验伸请间上姓名、年龄、性别、科室、床号等资料不对的拒收2、 有凝块标本拒收3、 重度溶血标本拒收4、 输液侧抽取血液标本拒收5、 抗凝比例、抗凝剂不对的拒收6、 重度脂血标本与临床医生沟通后再进行检测，并在报告单上注明标本重度脂血。不合格标本拒收后，需首先与临床医生联系，并建议临床建议更改错误或重抽血后送检。第三部分
12、、STA Compact 操作程序1. 仪器操作程序1.1.1 开机前的准备工作：将所需试剂、复溶试剂、标准血浆及质控血浆室温（1825）放置30分钟，并转运摇匀。1.1.2 开机打开UPS电源及仪器开关（仪器左侧部），并等待正常启动。打开电脑及打印机。1.1.3 装载试剂在主菜单loading下，按F2，打开试剂存放抽屉，如果换用微量管，请先用F8键，改为“Microcup”，放入试剂、质控及定标液。1） 使用STAGO条形码试剂瓶：（1） 从条形码扫描器上扫描试剂瓶信息，扫入后，应有声音提示。（2） 确认液体量，用ENTER确认，如果需要改动液体量，键入相应数字（ml），再用ENTER确认
13、。（3） 如果需要改变试剂的稳定时间，键入相应数字，并用ENTER确认。（4） 在任意位置放入试剂瓶相同的位置。注意：试剂瓶放入相同的位置。注意：需磁力搅拌的试剂（PT），在试剂瓶中放入磁力搅拌棒，并将试剂瓶放入磁力搅拌棒位置。2） 试剂更换新的批号（1） 屏幕提示“是否为新的批号”，选择“YES”，并用ENTER确认。（2） 按顺序扫描试剂盒中的白纸上的条形码。（3） 用ESC键退出此界面。3） 按照以上相应步骤装入试剂后，用ESC、YES键关上抽屉。此时，屏幕显示检测试剂等剩余量信息，如果某项试剂缺少或量不够，则用红色提示，需要重新更换或添加。4） 用ESC键退出，回到主屏幕如果试剂缺少或
14、量不够，则提示“NEW TEST ARE DELAYED REACTIVATE？ Y/N？”如果继续进行试验，则用Y键，如不继续进行试验，则用N键，回到主屏幕。5） 在主菜单loading下，按F1键打开样品存放抽屉，装入稀释液Owren Koller。5.1.4 质控的测定1） 质控的测定在主屏幕下，选择Calib/control中的Quality control，进入质控界面，用光标键移动渔村选择需要运行质控的项目，用F1选中些项目，此时该项目在左面应标“S”，如果不能选中，填写缺少参数，然后再回到质控屏幕，用F10键运行该项目。、2）质控程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的试验项目，用E
15、NTER进入统计范图菜单，在此菜单下可观察正常或异常质控数据。如果此项质控数值超标，可用ESC键，并选择“重新运行”该项目，质控在控方可进行检测。1.1.5 样本的测定操作步骤1） 标本采集和准备样本：准确抽取2.7ml静脉血，放入枸橼酸钠抗凝（蓝色管）真空采血管。按组内规定进行编号，逐一检查标本是否有凝块，如果有凝块，标本应退回。新标本于3000rpm下离心10分钟。2） 标本放置：在主菜单loading下，按F1键打开样品存放抽屉，装入待测标本（如果换用微量管请先按F8），按ENTER确认。（1）手工输入ID信息（抽屉打开状态下，用ESC键，选择“Manual mode”）输入ID号并用E
16、NTER键确认，在任意位置放入标本试管（或微量管），选择试验项目，在屏幕右下方的所有试验项目中选择。（对每一个项目，单次ENTER键确认或取消）也可以“Profile”中选择项目组合，按F10键确认，并输入下一个标本，用ESC键关闭抽屉，仪器开始检测。（2）自动输入ID信息（抽屉打开状态下，用ESC键，选择“Auto mode”）选择“Change Prefix”改变前缀或起始数字，“Change profile”改变项目组合。标本ID序号和项目自动显示在屏幕上，用ENTER键确认，在任意位置放入标本试管（或微量管）。下一个标本，序号自动增加。用ESC键关闭抽屉，仪器开始检测。1.1.6 急诊
17、标本在主屏幕下，ESC键进入状态栏，选择Status中“Block Sample Pippeting”至YES停止吸样，用ESC键退出此菜单，回到主屏幕，用F1键打开样品存放抽屉。如果换用微量管，请先用F8键，改为“Microcup”，用F12将此标本改为优先处理状态STAT，输入ID号（数字）选择测试项目，F10确认并输入下一个标本，ESC键关闭抽屉，仪器开始优先检测该标本，并优先打印结果。1.1.7 删除标本注意：此步骤也可以在每次开机后的第一显示菜单下运行删除。在主屏幕下用ESC键进入状态栏，选择File中的“Delete Patient File”，用ENTER键确认，按F4键，键入Y
18、ES，按ENTER键删除所有的标本资料，或F3键选择删除标本资料，用ESC键回到主屏幕。1.1.8 关机1） 在主屏幕下，用F2和F1键打开试验抽屉和样本抽屉。2）取出所的试剂瓶和样本注意：试剂的稳定时间和试剂量。如已换微量瓶，如有剩余，取出之前应记下该试剂名称。原试剂盒28可保存至有效期。复溶后的试剂37可保存8小时，20可保存48小时，28可保存812天，不能冷冻。3） 用ESC键关闭试剂存放抽屉，主屏幕下，用ESC键进入状态栏，选择Halt，用ENTER键确认，此时仪器自动进行全面冲洗后，提示可以关机。4）关机顺序：关主机电源，关打印机电源，关显示器电源。2 维护检查2.1 日常维护2.
19、1.1 开机前维护：将所需试剂、复溶试剂、标准血浆及质控血浆室温（1825）放置30分钟，并转动摇匀。2.1.2 使用后的维护：1） 在主屏幕下，用F2键打开试剂抽屉，取出所有试剂瓶。2） 用F1键打开样品存放抽屉，在主屏幕下，用ESC键进入状态栏选择“Halt”，ENTER键确认，此时仪器自动进行全面冲洗后，关机。4） 环境核对，每天应在上班时，检查室内的温度和湿度，并记录。如果温度或湿度超出规定的范围应采取措施予以纠正，如开空调进行调解。5） 记录：见仪器维护管理表2.2 定期维护2.2.1 每周维护保养：1）清洗2个空气过滤网：用吸尘器除尘或水洗。2）清洁洗针池及通针：用消毒剂0.37%
20、次氯酸钠（配制方法：向一体积原倍消毒剂中加N体积水量=（以%表示的消毒剂的浓度/0.37）-1，浸泡30分钟。方法在保养程序中选MAINTENANCE-NEEDLE PURGE，F6开抽屉，将三根针移到前面，将0.37%次氯酸钠加入清洗槽，用通针钢丝通针。3）清洁抽屉及测量模块：温水清洗抽屉及测量块表面。4）清洁测量通道：用蘸20%乙醇的棉签擦洗4个测量通道及16个孵育通道。5）加入冷却液：关机后进行，检查冷却液面高度，不足应加入冷却液乙二醇（Ref：38640）6）清洁吸杯头：选SUCTION TIP REPLACE-SUCTION TIP REPLACEMENT，将2号机械臂移出，抬盖将检
21、测杯塑料吸头取下用清水擦洗，安装好后按SPACEBAR退出。2.2.2 每月维护保养：1）更换注射器活塞头及O型圈2.2.3 不定期保养：1）更换试剂针2）更换光源灯3）更换保险丝2.2.4 组长负责仪器的全面管理2.2.5 维护保养具体操作参考STAGO-COMPACT仪器操作说明书（保养），手册编号-2.2.6 每年由STAGO公司维修技术人员对仪器进行全面的年保养。2.3 记录维护及校正内容：2.3.1 仪器操作人员应认真填写仪器维护校正记录*明确记录年间计划*记录计划和实施的记录程序2.4 仪器维修厂家名称：STAGO 联系电话800-810-9796，400-610-97963 故障
22、、异常时措施3.1 措施：一般的仪器报警可由操作者排除，但严重故障需由STAGO公司维修工程师来维修，不得拆卸仪器。3.2 一般故障3.2.1 检测不到反应杯：重新更换反应杯3.2.2 机械臂操作错误：（液面探测不到）检查试剂或样品的液面，必要时换试剂或样品。3.2.3 开始测试错误：试剂产品检测不到，可能已用完，装载即可。3.2.4 报警处理：1）冲洗液：更换新的冲洗瓶。废液真空瓶：清洗洗针池。孵育温度超出范围：检查冷却液。检查清洁液瓶及废液容器是否存在。检查废液容器的最大体积，松果废杯抽屉是否存在。2）检测不到反应杯：可能已用完，装载位、检测位检测不到运输车。3）CUP插槽通讯错误：按ES
23、C或ALT+F10键，关闭仪器，重新启动仪器。4）测量块通讯错误：按ESC或ALT+F10键，关闭仪器，重新启动仪器。5）外按计算机通讯错误：按ESC，检查仪器的样品号与外接计算机号是否一致。6）机械臂运动错误，针变弯：按ESC或ALT+F10键，关闭仪器，手动移动轴：X，Y，Z1，Z2，Z3。处理变弯的针（或更换），重新开机。7）开始测试的错误：试剂检测不到或用完，按ESC，装载。8）测量系统的错误：测量系统光源不工作，更换光源灯。9）样品或试剂的装载时抽屉卡住：移走障碍。3.3填写仪器维修记录3.3.1 记录内容：仪器名称、仪器编号、故障、简单的维修方法，消耗品、维修人员、仪器管理者签字。
24、3.3.2 组内负责人在维修费用（发票）签字，并填写医工处维修耗材申请单，报科主任批准签字，将发票、维修耗材申请单及维修单上交管理组，并由管理组上报医工处。4 注意事项4.1 安全注意事项：4.1.1 在使用可能发生感染或危及人身的样品时务必使用手套，避免直接接触。4.1.2 若试剂、清洁剂碰及身体可能会损害皮肤，应戴防护手套、戴眼镜。4.1.3 仪器的操作、保养按规定程序进行，不要触摸非指定部位。4.1.4 关于产品的废液按废液处理程序进行处理。4.2 测定注意事项：4.2.1 样品中不可有凝块、杂质等不溶性物质混入，以免针被阻塞造成测定不准确4.2.2 使用仪器时请测定质控样品并监测仪器是
25、否正常运行。4.2.3 关于试剂、质控样品、校准品等的保管方法、使用方法请遵照厂家的说明指示。4 参考文献STAGO-COMPACT仪器操作说明书（手册编号：*）5 仪器操作、维护管理操作日志记入要领 见附表1.2每日仪器开机检查的状态定期的维护保养内容和维护者签名操作者姓名操作年月日和维护时间一、凝血酶原时间（Prothrombin time，PT）1 目的本操作制定的目的是，为操作者进行凝血酶原时间测定提供正确的操作方法。2 适用范围适用于凝血酶原时间测定3 定义凝血酶原时间（Prothrombin time，PT）是一个基础的凝血筛选试验，常用来评价先天的和/或后天获得的外源性凝血途径(
26、因子、)。4 测定原理和临床意义4.1 测定原理 在待检血浆中加入过量的第因子和适量Ca2+,使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。采用凝固法，通过电磁感应,感测介质黏度变化，从而测定血浆凝固时间，与正常人凝血酶原时间比较，综合反映外源性凝血系统中因子（、）的水平。方法为自动血凝分析仪（STA Analyzers）Clauss凝固法。该试验对外源性凝血因子敏感：-因子II （凝血酶原） -因子V （易变因子） -因子VII （稳定因子） -因子 X （Stuart 因子。4.2 临床意义为外源性凝血途径检查的筛选试验，是综合反映凝血因子、含量及活性的指标。监测抗凝剂治疗。延长
27、：、因子先天性缺乏和低（无）纤维蛋白原血症；DIC的低凝期及继发性纤溶亢进期；原发性纤溶症；维生素K缺乏症；肝脏疾病（肝硬化、肝炎、黄疸）；循环血液中有抗凝物质；纤维蛋白降解产物（FDP）增多；口服香豆素类抗凝药；肠道重吸收紊乱；新生儿出血性剂病等。 缩短：血栓前状态或血栓性疾病、DIC早期、口服避孕药等。PT被广泛用于监测抗凝治疗(warfarin)，因为它的灵敏度可反映依靠维生素K的因子II,VII 和X的浓度变化，所以此试验所得的结果对确定治疗药物浓度是特异的。 众所周知，血浆PT的值由于凝血活酶试剂本身及所测量的仪器的不同而不同。WHO采用的一种标准品是“抗凝治疗强度凝血活酶国际参考标
28、准系统”，在这个系统中，PT比值被转换成国际标准化比值（INR），病人的PT和标准PT比值符合INR与ISI（国际敏感度指数）换算公式： INR=（病人PT / 平均正常PT）ISI 凝血活酶ISI 值通过使用国际参考品凝血活酶（IRP），由正常血浆和香豆素治疗病人血浆的凝血活酶来决定，PT值的获得可通过作log-log 图，并回归画出直线，该直线的斜率描绘的即是凝血活酶 ISI 值。 INR可用来评价口服抗凝剂治疗稳定的病人。1 实验室条件1.1 实验场所检验科临检室1.2 温湿度要求室温：15-30湿度：20-80%2 标本要求2.1 标本种类2.1.1 标本种类血浆2.1.2 标本量 最
29、适量 ：3ml 最小量 ：2ml 分析量 ：100ul不适标本的处理：采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下，拒收标本，及时与临床联系，并做好登记。2.1.3 容器枸橼酸钠抗凝管-9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中2.1.4 采集条件采集时间 ：检查对象生活饮食处于日常状态，安静。拒收标准 ：采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂有误等采集部位：静脉采血。 2.2 使用条件2.2.1 保存条件 -血浆20可保存8小时，收集后应尽可能快测试。 2.2.2 保存事项必须及时检验，放置过久可影响检验结果。2.2.3 保存天数：1天2.2.4 保存场所：临检室2.2.
30、5 特殊容器：无2.2.6 预防措施 标本为可感染性标本，应注意人员及环境的防护，防护措施请使用眼镜，口罩，手套等。1 试剂或培养基1.1 购入试剂（进口、进口分装、国产）：试剂名称品牌保存条件有效期限备注凝血酶原时间测定试剂盒STAGO2-8见试剂包装质控品STAGO2-8见试剂包装试剂成分： 凝血酶原时间测定试剂盒： R1（冻干血浆）：组织凝血活酶（来自新鲜的兔脑组织，含肝素抑制剂，从新鲜兔脑组织制备的冻干凝血活酶，ISI标定值根据批号不同，在每一个试剂盒中有准确的标定。复溶后，该试剂呈轻微浑浊状，不沉淀，适用于包括光学检测方法在内的全自动或半自动血凝仪器。试剂中含特殊的肝素抑制剂，PT不
31、受治疗水平内肝素浓度的影响，因此，PT延长表示真正的凝血酶原复合物的缺乏）R2（液体 ）：Ca2+（包含钙和含叠氮钠作为防腐剂）质控品： STAGO产品（STA Coag Control N+P），未开瓶的试剂于2-8保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值。1.2 试剂配制1.2.1 ：试剂种类1.2.2 配制方法 ： 准备：将一瓶试剂2倒入一瓶试剂 1中，室温（18 -25）放置30分钟，并轻轻摇匀。 保存：未经触动的原试剂瓶，2 -8可保存至有效期（包装盒外）。 复溶后的试剂
32、37 可保存8小时；20 可保存48 小时；2 – 8 可保存8-12 天。 * 不要冷冻1.3 配制试剂标签内容1) 试剂名称2) 配制日期3) 有效期限4) 特别说明5) 配制者 2 质量管理2.1 质控物的管理2.1.1 质控物质的种类，名称，浓度种类：干粉名称; STAGO Compact质控品浓度:正常值（M值）、异常值（L值）2.1.2 质控物质使用将质控物测定时从冰箱中取出质控品，在室温条件下放置15分钟，放置过程中勿摇动。2.1.3 测定周期每日一次（每日工作前） , 质控：每天测试运行前应运行质控。当质控结果不好时，分析结果应值得怀疑，检查测试系统功能是否正常，如测试条件、试
33、剂、血浆等。如有必要须重复运行质控测试。 2.1.4 保存方法2-8冰箱内，切忌冷冻2.1.5 允许范围±3SD之内或厂家规定的范围2.1.6 判断基准±3SD为失控，±2SD为警告2.1.7 失控时必须采取的措施若在3SD之外，则应查找原因，对仪器、试剂进行检查后，再进行质控测定，直至质控正常，才能进行样品检测。失控后应填写失控报告，通知组长，写明原因并进行签字，同时应将原始记录保存归档。 如果仪器状态不好，应请工程师来进行维护，必要时应进行校准。2.1.8 数据记录及保存形式：每日的质控数据自动传到计算机中保存，并将原始数据保存。每月由组长将质控图表及质控记录
34、打出进行总结，并交科室管理组。2.1.9 质控物的代替方案2.2 自制质控物的管理方法：无STAGO产品（STA Coag Control N+P），未开瓶的试剂于2-8保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值。将所需试剂、复溶试剂、质控血浆室温18-25放置30分钟，并转动摇匀质控的测定 1、在主屏幕下，ESC键进入状态栏。 2、选择“Calib/contrel”中的“Qudity Control”进入质控界面。 3、用、键移动光标选择需质控项目。 4、用F1选中此项目，此时该项目
35、左面应标“S”如果不能选中，则说明该项目中缺少参考时间，质控范围等参数，此时应用ENTER键入相应项目，填写缺少参数，然后再回到质控屏幕。 5、用F10键运行该项目，此时项目名称左面变成黄色。 6、质控程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的试验项目，用ENTER进入统计范图菜单，在此菜单下可观察正常或异常质控指标的每日、每月、每年统计的趋势图，切换正常质控指标，用F2或F3键，用F1键可查询相应的质控数据。 7、如果此项质控数值超标，可用ESC键，并选择“重新运行”该项目。3 操作程序 4 计算： INR=（标本PT/正常对照PT）ISI5 结果报告5.1 参考范围的种类：1) 标本种类：血浆参
36、考值 PT 11-15秒 PT活动度（%）（80-120）% INR 0.85-1.50不同的实验室，由于仪器和技术不同，其参考值范围也会不同，所以每个实验室必须在技术和使用仪器的基础上定义自己的正常参考值。 如果PT结果用活性的百分数来表示，正常期待值应高70%，如果结果超过100%，则没有病理学意义。 2) 设定依据：全国临床检验操作规程 中华人民共和国卫生部医政司 第二版3) 影响因素（生理变动）：5.2 异常结果处理1) 复查范围:测定结果超过或低于参考范围时，应与病情或历史结果进行比较，若与病情、历史结果不相符，或初次检测异常者应进行复查。必要时推片复查。若两次结果相近或与历史结果相
37、符，可以发送报告，若不符应与临床联系。 2) 危急值 项目范围单位PT>48s3) 异常结果的处理和联系方式：见应急处理程序5.3 报告形式报告样式：检测结果： PT结果可用下列报告方式： -秒： 报告凝固时间。 -比率：计算病人PT和平均正常PT比值，并报告这个比值。 -INR ：计算病人PT和平均正常PT比值，根据凝血活酶的ISI值计算INR。 -活性百分数：通过定标曲线，查出被测血浆PT的百分数值。 报告位数 5.4 报告时间: 当天6 影响因素1) 干扰物质（乳糜，溶血，黄疸等）：血浆中是否有凝块。抗凝剂比例、测量温度等。2) 交叉反应3) 药物 7 注意事项7.1 取血必须一针
38、见血，若抽血不顺利会影响结果的准确性。7.2 标本必须立即送检及时检查，时间过久将影响检验结果。7.3 血浆中有微量凝固块会使测试时间缩短（凝血因子被激活），而大量凝固会使PT时间延长，因为消耗了凝血因子和纤维蛋白原。7.4 应选择正确的抗凝剂，抗凝剂和血的体积比应为1：9。7.5 测量温度必须保持恒定。7.6 不要让试剂被血浆污染。7.7 过久将影响检验结果。7.8 应选择正确的抗凝剂，抗凝剂和血的体积比应为1：9。7.9 测量温度必须保持恒定。7.10 不要让试剂被血浆污染。8 操作记入要领 操作日志包含以下内容1) 检查测定标本数和再检标本数2) 管理样品精度的核对情况3) 和关联检查项
39、目的相关核对情况4) 检查室室温等环境的相关事项5) 超异常结果的处理6) 操作者姓名7) 操作年月日和检查测定的开始完成时间 9 手工操作 1、手工法 （1）测定温度36.538.5，上述各试剂及被测血浆，均应预温至此一温度，但凝血活酶试剂预温不可超过30分钟，血浆预温一般不宜超过10分钟。（2）所用试管及加样器等接触血浆的器具均为塑料或硅化玻璃管。（3）吸取枸橼酸抗凝血浆0.1mL，加入一小试管中：加入PT试剂0.2mL混匀后置37水浴中。立即混匀并开动秒表：试管仍浸于水浴中，至约10秒钟时，自水浴中取出，在纱布上迅速擦去试管外水滴，在明亮处不断倾斜试管，在流动状态下观察有无纤维
40、蛋白形成。一旦见到纤维蛋白（同时将出现液体流动减慢），立即停表，记录时间。每次测定二管，按平均数报告。本试验的最后混合液其pH应为7.27.3，大部分商品凝血活酶试剂均用含缓冲液的溶液配制。（4）每批均同时做正常和异常对照，方法应与测定标本完全相同。报告方式 1、以PT的秒（S）数报告（最接近的0.5秒） 2、以患者血浆（S）/正常对照PT（S）的比率（PRT）报告。3、 INR=（标本PT/正常对照PT）ISI二、血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）1 目的本操作书的制定的目的是，为操作者进行血浆活化部分凝血活酶时间测定提供正确的操作方法。2 适用范围适用于血浆
41、活化部分凝血活酶时间测定3 定义血浆活化部分凝血活酶时间（Acivated partial thromboplastin time ，APTT）是一个基础的内源性凝血途径筛查试验（因子、和）。APTT主要用于发现先天或后天获得的这些因子缺乏，以及肝素疗法的监测。APTT比其他的基础筛查试验（如复钙时间，部分凝血活酶时间）具有更高的灵敏度和更好的重复性。 4 测定原理和临床意义4.1 测定原理 APTT试剂包含一个标准数量的磷脂（血小板替代物）和特殊激活物（硅或白陶土），测试利用校准浓度的接触激活因子和类血小板磷脂与样本孵育后，加入适当浓度的钙离子，其纤维蛋白凝块形成的时间即为APTT。APTT
42、对内源性凝血途经（因子、和）敏感。该试验对血小板异常的定量和定性分析，因子 和XIII缺乏不敏感。 4.2 临床意义为内源性凝血途径检查的筛选试验；又是监测肝素的首选指标，APTT比其他的基础筛查试验（如复钙时间，部分凝血活酶时间）具有更高的灵敏度和更好的重复性。 延长：1先天缺乏： * 如果凝血酶原时间（PT）正常，可能是下列因子缺乏： -因子 （相应的乏因子试剂见 Cat.No:00725） -因子 （相应的乏因子试剂见 Cat.No:00724） -因子 （相应的乏因子试剂见 Cat.No:00723） -因子 （相应的乏因子试剂见 Cat.No:00722） * 如果这些因子都是正常的
43、，则应考虑下列物质缺乏： – Fletcher因子 -高分子量激肽原 2获得性缺乏和异常情况： -肝脏疾病 -消耗性凝血病 -循环中的抗凝物（抗凝血酶原酶或因子抑制物） -使用肝素或口服抗凝药物 缩短：见于高凝状态（如血栓前状态或血栓性疾病、DIC早期、口服避孕药等）。1 实验室条件1.1 实验场所检验科临检实验室1.2 温湿度要求室温：15-30湿度：20-80%2 标本要求2.1 标本种类2.1.1 标本种类血浆2.1.2 标本量 最适量 ：3ml 最小量 ：2ml 分析量 ：50ull 不适标本的处理：采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下，拒收标本，及时与临床联系，并做好登记。l 血
44、浆保存：20可保存4小时。如果用于监测肝素治疗，血浆在20可保存2小时。 2.1.3 容器枸橼酸钠抗凝管-9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中（NCCLSH3-A3，H21-A21标准）2.1.4 采集条件采集时间 ：检查对象生活饮食处于日常状态，安静。拒收标准 ：采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂有误等采集部位：静脉采血。 2.2 使用条件2.2.1 保存条件 -标本血浆在20保存4小时，如果采用肝素治疗，标本保存2小时。 * 不要将血浆置于2 – 8保存。 2.2.2 保存事项必须及时检验，放置过久可影响检验结果。2.2.3 保存天数：1天2.2.4 保存
45、场所：临检室2.2.5 特殊容器：无2.2.6 预防措施 标本为可感染性标本，应注意人员及环境的防护，防护措施请使用眼镜，口罩，手套等。1 试剂及质控品试剂名称品牌保存条件有效期限备注APTT测定试剂盒STAGO2-8见试剂包装质控品STAGO2-8见试剂包装试剂成分：凝血酶原时间测定试剂盒：APTT(悬浮颗粒溶液中包含脑磷脂和激活因子)、CaCl2溶液。质控品： STAGO产品（STA Coag Control N+P），未开瓶的试剂于2-8保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值
46、。1.1 试剂配制1.1.1 ：试剂种类1.1.2 配制方法 ： 准备：复溶试剂，加入相应量的蒸馏水（试剂瓶上标明）。 复溶后的试剂在室温（18 -25）放置30分钟，然后轻轻摇匀，以获得同质的悬浮状态 保存：未经触动的原试剂瓶，2 -8可保存至有效期（包装盒外）。 复溶后的试剂 20 可保存48 小时；2 – 8 可保存7 天。 * 不要冷冻1.2 配制试剂标签内容1) 试剂名称2) 配制日期3) 有效期限4) 特别说明（毒性，挥发性）5) 配制者2 质量管理2.1 质控物的管理2.1.1 质控物质的种类，名称，浓度种类：干粉名称; STAGO产品浓度:定值2.1.2 质控物质使用将质控物测
47、定时从冰箱中取出质控品，在室温条件下放置15分钟，放置过程中勿摇动。2.1.3 测定周期每日一次（每日工作前） , 质控：每天测试运行前应运行质控。当质控结果不好时，分析结果应值得怀疑，检查测试系统功能是否正常，如测试条件、试剂、血浆等。如有必要须重复运行质控测试。 2.1.4 保存方法2-8冰箱内，切忌冷冻2.1.5 允许范围±3SD之内或厂家规定的范围2.1.6 判断基准±3SD为失控，±2SD为警告2.1.7 失控时必须采取的措施若在±3SD之外，则应查找原因，对仪器、试剂进行检查后，再进行质控测定，直至质控正常，才能进行样品检测。失控后应填写失控
48、报告，通知组长，写明原因并进行签字，同时应将原始记录保存归档。 如果仪器状态不好，应请工程师来进行维护，必要时应进行校准。2.1.8 数据记录及保存形式：每日的质控数据自动传到计算机中保存，并将原始数据保存。每月由组长将质控图表及质控记录打出进行总结，并交科室管理组。2.1.9 质控物的代替方案2.2 自制质控物的管理方法：无STAGO产品（STA Coag Control N+P），未开瓶的试剂于2-8保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值。将所需试剂、复溶试剂、标准血浆及质控血
49、浆室温18-25放置30分钟，并转动摇匀质控的测定 1、在主屏幕下，ESC键进入状态栏。 2、选择“Calib/contrel”中的“Qudity Control”进入质控界面。 3、用、键移动光标选择需质控项目。 4、用F1选中此项目，此时该项目左面应标“S”如果不能选中，则说明该项目中缺少参考时间，质控范围等参数，此时应用ENTER键入相应项目，填写缺少参数，然后再回到质控屏幕。 5、用F10键运行该项目，此时项目名称左面变成黄色。 6、质控程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的试验项目，用ENTER进入统计范图菜单，在此菜单下可观察正常或异常质控指标的每日、每月、每年统计的趋势图，切换正常
50、质控指标，用F2或F3键，用F1键可查询相应的质控数据。 7、如果此项质控数值超标，可用ESC键，并选择“重新运行”该项目。3 操作程序4 结果报告4.1 参考范围的种类：1) 标本种类：血浆参考值 APTT 28.0-43.5秒 2) 影响因素（生理变动）：4.2 异常结果处理1) 复查范围:测定结果超过或低于参考范围时，应与病情或历史结果进行比较，若与病情、历史结果不相符，或初次检测异常者应进行复查。若两次结果相近或与历史结果相符，可以发送报告，若不符应与临床联系。2) 危急值项目范围单位APTT>48s3）异常结果的处理和联系方式：见应急处理程序4.3 报告形式报告样式：秒报告位数
51、 小数点后一位4.4 报告时间: 当天5 影响因素1) 干扰物质（乳糜，溶血，黄疸等）：血浆存在中凝块。抗凝剂比例、测量温度等。2) 交叉反应3) 药物 6 注意事项6.1 取血时必须顺利，应一针见血，以防组织损伤，外源性凝血因子进入针管，将影响结果测定。6.2 标本必须立即送检及时检查，时间过久将影响检验结果。6.3 血浆中有微量凝固块会使测试时间缩短（凝血因子被激活），而大量凝固会使PT时间延长，因为消耗了凝血因子和纤维蛋白原。6.4 应选择正确的抗凝剂，抗凝剂和血的体积比应为1：9。6.5 测量温度必须保持恒定。6.6 不要让试剂被血浆污染。6.7 相关治疗与变化肝素疗法： -高剂量治疗
52、：治疗的目的在于产生一个稳定的循环肝素水平，以保持一个有效的低凝状态，同时应避免不必要的大剂量带来的危险。未组分肝素（UFH）的监测可用APTT实验，肝素定量测定对其是一个补充，（STAGO可提供试剂：00691 STA-Staclot Heparin,00612，00661 STA-Rotachrom Heparin）。 APTT和肝素定量测定的结果不总是相关的，作为一个反映病人总体凝固水平的APTT试验，其结果常被以下几种情况影响： -肝素的存在 （导致APTT延长） -可能有炎症存在（因子：C和纤维蛋白原水平升高，对抗肝素引起的APTT延长）。基于这一原因，血浆肝素水平的测定是对APTT
53、结果的一个必要补充。 APTT和血浆肝素水平不一致的情况： -肝素水平正常，APTT轻微延长：炎症（常见于术后），抗凝血酶（AT）缺乏。 -低肝素水平，APTT延长很多：存在止血紊乱（循环中抗凝物、凝血因子缺乏等）。 低分子量肝素治疗的监测可用LMWH抗Xa活性测定来进行（STAGO可提供试剂：00691 STA-Staclot Heparin，00612，00661 STA-Rotachrom Heparin）。 治疗期间可见明显的APTT延长，不过，这些延长与血浆LMWH没有直接相关，而是相关肝素中抗Xa/抗IIa活性比率的作用，治疗期间这个比率的变化是由于抗Xa和抗IIa活性的半衰期不同造成的。 -低剂量治疗： 据Kakkar 方案或“可接受剂量”方案，使用低剂量UFH治疗可导致APTT延长。 用LMWH预防剂量治疗期间偶见APTT延长，没有意义。 如果必要，这些治疗的监测使用特意的抗Xa分析法（UFH和LMWH）。 -注意： 无论何种类型肝素（UFH或LMWH）、剂量多少，建议在治疗前和治疗中作常规的血小板计数，以发现肝素诱发的血小板减少症，根据临床观察，AT-监测也是有必要的。 从肝素转为口服抗凝剂治疗： 肝素治疗到口服抗凝剂治疗的转换期间，为了评价两种治疗的效果和调节剂量，除APTT和肝素测定外，凝血酶原时间测定也是必要的。 口服抗凝治疗：可用A
