在日常体检或输血过程中，血型鉴定是一项基础且重要的检测。然而，有时候在实验中结果会呈现出“非阴非阳”的现象——双群(double population,DP)。今天，我们就用在本院输血科工作中实际遇到的案例，来探讨一下这“神秘”的双群现象。
一、案例分享
患者背景：王先生，男性，35岁。于2024年12月16日在双峰县人民医院体检中心进行抽血送交输血科进行检测。
检测过程：初次血型鉴定时，微柱凝胶法检测结果如下:
红细胞上的B抗原和E抗原皆出现双群。
进一步复查验证：更换新鲜A型和B型RBC悬液，并将血型卡提前离心，且患者的血标本再次充分离心，但重测后仍与第一次结果一致。
于是笔者使用试管法复检血型正定型进行验证，具体步骤为:用生理盐水洗涤后的受检者红细胞制备成洗涤红细胞悬液，分别加入试管1（含有抗-A试剂）及试管2（含有抗-B试剂），混匀进行初步观察。肉眼并不能准确判断是否存在混合凝集现象，故而进一步采用显微镜进行观察，发现在抗-B试管中，确实存在着混合凝集的现象，可观察到红细胞凝集团以及并未凝集的大量分散红细胞，故而判断为与卡片结果一致。（可见大量分散游离红细胞）
二、认识微柱凝胶法
微柱凝胶法是一种常用于血型鉴定的技术，其原理结合抗原抗体反应与凝胶分子筛技术。该方法是将红细胞与血型抗体在微柱凝胶介质中混合并在37℃左右孵育，通过调节凝胶水平控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离红细胞通过，达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的，离心后观察结果。
如果红细胞表面存在与抗体相应的抗原，则会形成抗原-抗体复合物。这些复合物在离心过程中无法通过球形的凝胶颗粒，从而停留在微柱上方，形成凝集反应。相反，如果没有相应的抗原，离心后分散红细胞会通过凝胶沉降到微柱底部，表明无凝集反应。故可用已知抗原检测抗体或用已知抗体检测抗原。
在微柱凝胶法的结果判读上，DP双群结果虽然少见，但对实验结果的判断干扰却很大。
（图1）
（图2）
微柱凝胶法在血型/交叉配血试验中红细胞凝集反应结果判读上可能出现：++++、+++、++、+、+/-、-、溶血、双群(D.P)共8种结果，在这些结果中，D.P双群结果就是微柱凝胶顶部和底部同时可见凝集红细胞。
三、什么是双群？
双群是指在血型鉴定过程中，红细胞在与某种血型抗体反应时，呈现出部分凝集、部分不凝集的现象（即为图2中的混合性），从而形成混合凝集现象。这种情况并非常见，往往需要进一步的检测来确定受检者的真实血型。
��真实阳性:
产生机理为:一个反应体系中针对体系中的抗体，受检者的红细胞既有对应抗原阳性的，同时有对应抗原阴性的，导致结果阳性和阴性同时存在，产生混合凝集现象。
常见原因：
l 混合血液标本:近期输血、骨髓移植（患者红细胞生成期红细胞血型系统表态呈嵌合状态，从而造成D.P双群模式出现）、器官移植、胎母出血等。且本文中所示案例王先生的RH血型系统中——E抗原也呈现双群反应。若患者存在输血史，双群可能为Rh血型不同型输注导致。可在配血时针对在消化内科、ICU等等需要反复输血的科室患者，在首次输血前对供血血袋进行Rh抗原分型检测，尽量选用Rh抗原同型的血液进行输注，可以避免患者产生该系统的不规则抗体，从而保证更加安全且有效的输血，能降低配血不相符的概率，避免因配血不顺而导致耽误最佳输血时机，高效地挽救患者的生命。
l 亚型存在：例如，A3亚型血型是A型红细胞较常见的亚型之一，其最大的血清学特征是与标准抗A血清反应时出现“混合视野”或“双群”现象。A3亚型，D.P双群明显，原因是A3亚型红细胞A3抗原与抗-A抗体发生弱的凝集造成；
l 抗原减弱：某些疾病或药物影响下，体内红细胞血型抗原表达可能降低，导致血型鉴定时出现双群反应。
l 存在自身抗体:双群为患者部分红细胞被自身抗体包裹，无法顺利通过凝胶而留在凝胶上层或游离在凝胶中所致。
l 血型变异：极少数情况下，由于基因突变等原因，个体可能表达出一种新的血型抗原，从而导致双群反应。
��假阳性（更为常见）:
l 红细胞碎裂:导致碎片无法通过凝胶间隙位于凝胶表面，可能患者红细胞有轻微溶血，通过洗涤患者红细胞后复查D.P双群可不再出现。
l 加样枪尖、凝胶卡覆膜携带污染造成。
l 凝胶卡破损:换新批号的凝胶卡离心后复查结果正常，经观察比较凝胶卡内缓冲液挥发、有气泡、断胶，造成破损的主要原因是凝胶卡运输不妥和保存不当。
l 抗凝不全:原因是血浆中纤维蛋白在离心时析出，纤维蛋白堵塞凝胶表面间隙阻拦部分红细胞下降，从而造成双群，这种情况也叫表面“红线”，可以尝试通过再次充分离心，调整离心力或离心时间来避免纤维蛋白的干扰，从而得到正常的结果。
四、临床意义：
l 输血安全：双群反应提示血型鉴定结果存在不确定性，必须进行进一步检测以确保输血安全。避免因ABO血型系统或者RH血型系统不合而导致不良输血事件，减少输血过程中的迟发性溶血反应。
l 疾病诊断：某些疾病，如白血病、骨髓瘤等，可能导致部分血型抗原减弱或消失，从而出现双群现象。
五、如何应对双群？
1. 医学工作者：
l 仔细分析：双群出现时，应仔细分析可能的原因，以专业的态度，孜孜不倦的学习精神，完善自身的知识储备，进一步检测以发出更为准确的报告。
l 加强沟通：及时与患者或者临床沟通，解释双群反应的原因和进一步检测的重要性，避免患者产生不必要的恐慌，且可提前为输血患者进行安全输血准备。
2. 受检者：
l 保持冷静：报告提示出现双群反应时，不要惊慌，应积极配合进一步检测。
l 关注健康：双群反应有时可能提示潜在的健康问题，应关注自身健康状况，及时就医检查。
双群，它的出现为我们敲响了警钟，提醒我们在输血相关检测和学习中要时刻保持着严谨态度，不断追求精进准确。在保障输血安全的道路上，通过每一次发现，积累每一次宝贵的经验，为患者的生命安全保驾护航。
参考资料：
1. 《血型鉴定卡式法与试管法比对实验的评价》，张晓卿等等，《实用医学杂志》2006年
2. 《微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血中的应用》，于海忠，《临床和实验医学杂志》2012年
3. 《微柱凝胶法检测血型及配血出现双群结果原因分析》，张 川，《检验医学与临床》2018年
4. 《卡式血型鉴定出现双群结果临床意义分析》，原敏，《实用医技杂志》2007年22期30 09-30 10,共2页
图文：刘雅彬
编辑：刘霞
责编：曹景
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