总体来说，实验动物安乐死的方法有三大类：注射药物法（静脉、腹腔等注射药物）；物理方法（颈椎脱臼、断头、放血等）；吸入性药物法 （二氧化碳、氮气、一氧化碳、乙醚等）。
1）注射药物法
通过注射过量的药物，使动物迅速死亡，是非常可靠的动物安乐死方法。通过静脉或腹腔注射过量巴比妥类药物迅速导致意识丧失和呼吸停止，适用于多种动物，应用范围较广。注射巴比妥药物的优点在于可以平稳的诱导并麻醉动物，因为其效果依剂量、浓度和投药方式而不同，可使动物的不适反应降到最低，失败的可能性低于物理方法，可以保留完整的身体结构。注射巴比妥类药物的缺点在于此类药品是管制类药物，需要满足对于获取、存储、使用及记录相关药品的要求。使用巴比妥类也会引起一些动物福利问题，包括抓取动物进行注射而导致的应激；在血管周围注射溶液后潜在的疼痛；剂量没有掌控好，没有进行死亡的验证，有潜在苏醒的可能。这种安乐死方法需要采用辅助的方法确认动物是否死亡；需要对人员开展准确实施腹腔注射或静脉注射的相关培训。
2）物理方法
物理的安乐死方法主要有颈椎脱位、断头、放血、微波刺激等，物理法只要在良好的技巧及适当的工具的配合下，能迅速使动物解除疼痛达到死亡。但是未受过训练的人员去实施物理性方法时，不仅容易造成人员受伤，更可能使动物因未完全死亡而造成极大的痛苦。
物理方法在动物安乐死中的应用具有以下优缺点：
优点
1.成本低廉：物理方法通常成本较低，不需要昂贵的设备或化学药剂。
2.无化学污染：避免了化学药剂对组织可能造成的污染。
3.执行效率高：在正确操作的情况下，能够快速完成安乐死过程。
4.设备需求少：有些物理方法甚至不需要特别设备即可执行。
缺点
1.技术要求高：对操作者的技术熟练度有较高要求，不当操作可能导致动物遭受更多痛苦。
2.不适用于某些研究：对于需要保持动物头颈部完整的研究，物理方法不适用。
3.可能导致动物紧张：在抓取和保定动物的过程中可能会引起动物的紧张和恐惧。
4.感官刺激大：对实施安乐死的人员感官上的刺激较大，需要进行心理培训。
5.存在潜在危险：所有物理方法均会产生创伤，对实验动物和操作人员都可能构成潜在风险。
动物福利角度
1.适用性：在物种选择合理且麻醉措施得当的情况下，物理方法可以作为合适的安乐死手段，减少动物的不必要痛苦。
2.心理培训：需要对执行安乐死的人员进行心理培训，以应对感官上的刺激。
3.潜在风险：应注意物理方法可能带来的创伤和对实验人员的危险，采取相应的安全措施。
综上所述，物理方法在动物安乐死中是一个成本效益高且操作简便的选择，但同时也需要注意技术要求、动物福利和人员安全等方面的问题。
3）吸入药物法
吸入药物法是一种广泛应用的实验动物麻醉与处死技术，它涉及多种不同的吸入性麻醉剂，其中最为常见且重要的包括二氧化碳、氮气、一氧化碳以及乙醚等。这些麻醉剂各有其特点和用途，但在实验室中，特别是在处理实验啮齿动物时，二氧化碳法往往成为首选。
在采用二氧化碳法处死实验啮齿动物时，首先需要确保动物被安全地放置在专用的二氧化碳麻醉箱中。随着大脑中二氧化碳含量的逐渐积累，动物的神经系统开始受到抑制，导致它们的意识逐渐模糊，直至完全丧失。这一过程不仅是渐进的，而且是相对温和的，使得动物在几乎无痛苦的状态下进入深度麻醉状态，并最终走向死亡。
二氧化碳吸入法作为安乐死的一种方式，因其多方面的优点而广受青睐：
1.操作简便：这种方法不需要复杂的设备或技术，易于实施。
2.安全可靠：对动物和实验人员来说，它是一种安全的选择，风险较低。
3.效果显著：能够迅速有效地实现实验目的，确保实验的顺利进行。
4.成本低廉：作为一种廉价且容易获取的气体，二氧化碳的使用大大降低了实验成本。
5.环保无害：二氧化碳在动物体内分解后，不会对环境或动物组织造成污染，符合环保和动物福利的标准。
然而，在使用二氧化碳法时，我们仍需注意一些细节问题。为了确保动物在丧失意识前不会感到痛苦，建议实验人员在填充二氧化碳时控制好速度。具体来说，根据国家制定的安乐死指南，每分钟填充的二氧化碳量应控制在麻醉箱体积的30%至70%之间，以确保动物能够平稳地进入麻醉状态。
同时，我们还需要密切关注动物的反应和状态，以便在必要时采取适当的措施。上海玉研仪器有限公司自研的一体式安乐死系统能精准、精确、实时地调整二氧化碳流量和浓度，通过透明观察窗可观察到动物，确保动物在动作（肌肉活动）消失之前，动物首先丧失意识，从而实现无痛苦、无疼痛的死亡，符合国家安乐死指南标准。
