北京市肺炭疽样品采集和运送技术方案（试行）2020年版
为科学、及时采集和运送肺炭疽病例样本和环境样本，规范采集和运送过程，保证生物安全，为肺炭疽疫情调查处置提供指导，特制定本方案。
一
样本采集对象
1
病例样本：
肺炭疽疑似病例、临床诊断病例、确诊病例及其他需要进行肺炭疽诊断或排除诊断者。
2
环境样本：
可能被炭疽芽胞杆菌污染的物品及环境。
二
样本采集要求
1
人员资质与防护：
从事样本采集的技术人员必须经过生物安全培训并具备相应实验技能。采样过程中，人员应采取生物安全二级（BSL-2）个人防护措施。
2
职责分工：
住院病例：由所在医院医护人员在属地区疾控中心专业人员指导下采集。
密切接触者：由属地区疾控中心负责采集。
采样决策：标本采集的具体种类和数量由现场工作组确定。
动态采样：根据实验室检测及疫情处置需要，结合病程进展进行再次采样。
三
样本种类及采集方法
通用原则：
时机：病例样本应尽可能在使用抗生素前采集；环境样本应在疫情发生后尽快采集。
容器：样本须放置在干燥无菌的离心管中，不可放置在病毒采样管中。
处理：样本管内不做任何处理，及时送检。
策略：疑似病例根据临床表现采集；环境样本应尽量多点、多面采集。
（一）病例样本
1
皮肤涂抹样本
水泡期：使用2支无菌棉拭子采集疱疹水泡液，或使用无菌注射器抽取疱疹内液体。
结痂期：小心提起焦痂，用无菌棉签在患处转动2-3次，采集焦痂下的分泌物或渗出液；或使用无菌生理盐水浸湿的无菌棉拭子涂抹焦痂表面和周围皮肤。
保存：拭子样本直接置于干燥无菌的离心管中。
2
血液样本
全血：按照标准静脉采血程序，采集3-5mL静脉血。注意：有皮肤炭疽表现者，采血部位应远离皮损及可能被污染的区域。使用非抗凝分离胶采血管。
血清：分别采集双份血清（急性期和发病后1-2周恢复期）。
3
痰液样本
自然咳痰：患者用力吸气后咳出1-2口痰，置于干燥无菌离心管中。
诱导咳痰：收集困难时，可用无菌棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射后采集。
昏迷患者：可用负压吸引法采集。
特别提示：肺炭疽（特别是早期）患者痰液和咽拭子检出阳性率较低，建议尽量采集胸水样本。
4
支气管肺泡灌洗液样本
方法：采用纤维支气管镜，严格按照无菌操作规范进行灌洗。
用量：采集3-5mL灌洗液，放入干燥无菌离心管中。
5
胸腔积液样本（推荐）
优势：一般早期即可检出炭疽芽孢杆菌，应尽量采集。
方法：经X光或超声定位（通常在第7-9肋骨间），行胸腔穿刺术。
注意：有皮肤炭疽表现者，穿刺部位应远离皮损区域。
用量：抽取3-5mL，不做抗凝处理，放入干燥无菌离心管中。
6
粪便及呕吐物样本
对象：有肠道症状的肺炭疽病例。
方法：挑取5-10g样本（粪便尽量选取脓血等病理变化部位），放入干燥无菌离心管中。
注意：避免消毒剂、尿液等污染。
7
脑脊液样本
对象：出现脑膜刺激征的疑似病例。
方法：按临床规范采集3-5mL，放入干燥无菌离心管中。
注意：穿刺部位应远离皮损区域。
（二）环境及动物样本
1
可疑物品样本
草料、皮毛：多点少量取样。毛皮等可剪碎，放入干燥无菌离心管中。
大体积物品表面：使用无菌生理盐水浸湿的无菌棉拭子进行表面涂抹，拭子放入干燥无菌离心管中。
病死畜组织/肌肉：取50g左右，剪成小块，放入干燥无菌离心管中。
2
土壤样本
地点：病畜死亡或宰杀地点。
方法：用无菌铲取50g左右被血液污染的土壤，放入干燥无菌离心管中。
四
样本运送要求
（一）样本送检单
放置：填写完成后与样本分开放置，保证清洁。
内容：
病例信息（仅限病例样本）：姓名、性别、年龄等。
样本信息：送检编号、样本类型。
采集信息：采样单位、时间、地点、部位（仅环境样本）。
送检信息：送检单位、时间、送检人。
（二）样本标识
容器外表面显著位置清晰标注样本送检编号，并与送检单信息一致。
（三）样本包装
等级：炭疽芽胞杆菌属第二类病原微生物，必须采用国际民航组织《危险物品航空运输技术细则》中的A类包装（联合国编号：UN2814）。
（四）运送条件
时效<1小时：可直接室温运送。
时效>1小时：应在2～8℃条件下运输。
建议在外包装容器和辅助容器（运输箱和黄桶）之间放置冰排。
注意：培养标本不可冷冻。
方式：专人专车直接送达。
（五）样本交接
送达实验室后，运送人员须与收样人员进行当面交接。
五
生物安全要求
（一）采集过程防护
采样人员需采取传染病二级防护措施：
N95医用防护口罩
工作帽
护目镜或面屏
双层医用乳胶手套
医用连体防护服
工作鞋和鞋套
（二）包装过程规范
所有样本置于干燥无菌离心管中，确保管外表面清洁。
外包吸水材料后放入黄桶。
黄桶清洁后，与冰排一起放入转运箱。
操作全程保证转运箱外表面不被污染。
（三）运送过程管理
法规遵循：严格执行《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院424号令）及《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（卫生部45号令）。
准运证：运送前必须办理准运证。
专人专车：必须专人专车直接送达，不得中途停留。
单据分离：送检单与样本分开放置，但需同时运送。
人员要求：送样人员穿工作服，严禁在中途打开运输箱。
来源：一线公卫防控
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