欢迎光临
我们一直在努力

喉镜消毒用什么酶RNase

体液(指酶:Fingerase)

体液(如汗液和皮肤油)中含有丰富的RNase活性(此类来源的RNase也被戏称为指酶Fingerase,即手指上的酶)。因此,双手不戴手套会非常容易造成RNase污染,从而对关键实验造成影响。请在实验过程中佩戴手套,并经常丢弃用过的手套,再换上一副新的手套。

  • (提示:与裸露皮肤接触过的,摸过冰箱把手、门把手、移液器、钢笔/铅笔或实验室电话的手套均可视为被RNase污染)

一直穿着实验服,以避免您衣物上的某些颗粒物质掉入样品。请避免在气流扰动的环境或可能形成微粒的表面附近(如黑板)操作RNA。

枪头与离心管

高质量的实验室塑料耗材一般可视为不含RNase。不过,枪头和离心管容易成为被忽视的RNase污染源。请确保从未开包的枪头盒中取用枪头,离心管也需来自未开包的,或经小心操作的包裹。仅进行高压灭菌操作无法破坏全部RNase活性,因为这些酶类耐受性强,而且降至室温后又会重新恢复部分活性。请务必使用经过无RNase检测并具有相关认证的枪头和离心管。Life Technologies提供品种、规格齐全的经认证过的以满足广泛的实验需求。在操作RNA的过程中,请使用带RNase-free隔离层(滤芯)的加样枪头以避免引入RNase或RNA样本之间的交叉污染。多种尺寸的Invitrogen (包含滤芯的枪头)能够适配绝大多数的常规移液器。我们同时也提供常规型和无粘附性的 ,可适用于任何分子生物学实验。每一批次的枪头和离心管都经RNase与DNase污染的严格检测,并通过无核酸酶(nuclease-free)的相关认证。

需要使用玻璃器皿和金属器皿时,请使用试剂或湿巾进行处理。如需使用大量器皿,也可对其进行烘烤处理。烘烤操作通常需要在450°F(232°C)下进行2小时或更长时间(不要放入胶带,会导致起火!)。在烘烤之前,请确保将金属器皿物体,以及烧杯和烧瓶的顶部用铝箔包好,以避免在烘烤之后再度发生污染。如果两小时的等待时间过长,请使用试剂或湿巾作为良好的替代法进行处理。请务必确保试剂不要与钳、铲或其他具有活性金属表面的器皿(如铝制物品)接触超过数分钟,因为这会导致金属表面的腐蚀。将烘烤好的或试剂处理过的物品标上RNase-free的记号,以便与未处理的物品进行区分。我们推荐将处理过的物品存放于明确标有RNase-free的区域内,以避免偶然性的污染事件。

水与缓冲液

由于RNase无处不在,供水设备的来源及日常维护常导致分子生物学应用中的水和缓冲液成为RNase污染的常见来源。焦碳酸二乙酯(DEPC)处理是灭活水和缓冲液中RNase最常用的方法。不过,包括Tris在内的某些试剂不能使用DEPC进行处理。我们能提供多种Ambion缓冲液和水(经DEPC处理或未经DEPC处理)的相关产品,经过严格的质量控制以确保其中去除了RNase。

DEPC处理是消除水体、缓冲液及其他溶液中RNase污染最为常用的方法。(注意:某些缓冲液不能使用DEPC。请参见下方的段落,以及“DEPC的替代品”部分。)DEPC能够通过修饰RNase及其他蛋白中的-NH、-SH和-OH基团来破坏酶的活性。处理步骤通常包括将溶液与0.1%的DEPC在室温下共同孵育数小时——通常过夜——之后对溶液进行高压处理以去除残余的DEPC。部分研究人员注意到在对DEPC处理的溶液进行高压灭菌之后,会嗅到一种果味的芳香气味,便担心这可能是未灭活的DEPC。其实这是由于高压灭菌灭活DEPC过程中,产生了少量的乙醇。乙醇可能会与痕量的羧酸相结合,生成挥发性酯类从而散发出此种特殊气味。这并不是DEPC未经完全消除的信号,不会对后续反应造成干扰。

含有伯胺基(如Tris)及一些含有仲胺或叔胺(如HEPES)的试剂不能使用DEPC进行处理。胺基会与DEPC反应并将其吸收,这样就无法实现对RNase的灭活处理了(参见178号技术通告)。同时,对试剂中胺基的修饰也会影响其缓冲能力。对于只能进行过滤除菌,而不能耐受高压灭菌的溶液,如MOPS,也就不适合用DEPC来处理,因为高压灭菌是灭活DEPC必不可少的步骤。

无 RNA 酶水(未经 DEPC 处理)经过了去离子、过滤到最终的瓶中、高温高压灭菌这三个步骤的处理。现在其随时可用,无需配制、混合或高温高压灭菌。针对污染性非特异性核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 活性对该无核酸酶水进行了严格检测。

回到页首
赞(0)
未经允许不得转载:上海聚慕医疗器械有限公司 » 喉镜消毒用什么酶RNase

登录

找回密码

注册