灵活的BDInflux™分选系统可以适应各种科研应用及环境要求。
其模块化的结构,手动操控,支持多达10激光,可更换光路检测,高通量,以及六路分选的特点,使得这套系统可以根据高端研究中独特的需求而进行灵活的设置。
此外,BDFACS™Sortware分选软件帮助研究者实现全方位的控制,从机器配置,补偿设置,获取,分选到分析过程,全部轻松掌控。
液流系统
创新的液流设计BDInflux™液流系统的特色是其独有的声学耦合喷嘴组件,能可靠形成用于分选的液滴,同时确保即使在高鞘液压力下有较低的剪切力,保证高细胞活性。
为了支持无菌分选,液流管路能很容易地被取下,并用选配的可更换液流套件来替换。
喷嘴组件和喷嘴尺寸
BDInflux系统的核心技术之一是其独有的声学耦合喷嘴构件,能确保在液滴形成时得到高信噪比。这种独特的设计在液滴形成过程中最大限度地减小噪音,从而可以在高频的液滴振荡下使用相对较小的鞘液压力。
一系列不同尺寸的喷嘴选择,方便用户研究不同的细胞和颗粒类型。
样品站和液流控制台
样品站和液流控制台控制样品的流动、样品管路的反冲、助推和不同的上样压力。气泡监测器可以在样品管跑空的时候停止上样,从而避免气泡到达喷嘴。
不锈钢桶内加压的不锈钢鞘液桶可以让用户使用不同的清洁程序,以适应不同的应用需求。
可更换的液路
在细胞分选中的一个非常重要的问题是交叉污染,无论是样品间或是与外源的物质,比如细菌、病毒或DNA。为了避免交叉感染的风险,研究人员可以在几分钟内更换样品管路。样品管路直接进入喷嘴头,使细胞与任何非更换部件接触的可能性降至最低。
光路系统
直观的光路调节光路系统将激光直接照射到检测点,操作方便、直观、可适用性强。可配置多达10个激光光路。可选的激光器波长包括:355-nm,405-nm,445-nm,457-nm,488-nm,515-nm,532-nm,552-nm,561-nm,594-nm,640-nm和785-nm。
系统还可配置一系列标准检测模块以满足不同应用需求。
快速简单的光路调节过程
10个激光光路和7个针孔的光学收集系统支持24个参数同时检测和24×24矩阵补偿。配置5个或以下激光器的系统支持16个参数同时检测和16×16矩阵补偿。
对于每个激光器,光线通过单独的光路成型,最后通过一个专用透镜进行调整和聚焦,透镜将光线从不同角度引导到液流上。
对于10激光系统,激光以共线的形式通过引导光路和聚焦透镜,但和液流相交在7个独立的空间点。荧光经由一个高数值孔径的物镜收集并聚焦在独立的镜面针孔,可降低激光器之间的干扰。
BDInflux光学系统采用模块化设计,当研究需求改变时,激光器可以很容易地进行升级。
此外,可适用的激光器的广泛选择也在不断拓展,与先进的研究需求保持同步。
这种获得专利的光路设计使用一个特殊的针孔摄像机对液流和针孔同时成像,大大简化了光路调节过程。
针孔摄像机观察
BD注入系统使用针孔摄像头,有助于确保荧光与探测器完美对齐。针孔相机让研究人员通过针孔光圈的镜像表面,在光心处观察流,然后将其对齐,使细胞聚焦。当细胞被照相机聚焦时,系统被最佳地对准以检测荧光。
收集镜头、针孔摄像机和镜面针孔示意图单个激光定位器
激光截获和针孔的独立激光束对准和视频控制允许快速和直观地对准多个激光器。
分选系统
灵活的分选TBDInflux™系统具备两路、四路和六路分选,以及微孔板分选功能。BDInflux电子系统支持高速分选,而且BDAccudrop技术有助于简化分选的优化调节。多路分选一次隔离多个种群可以节省时间,并有效地利用样本。
无论是对一个或六个子群体进行分类,BD流入分类机都可以快速配置,以最适合研究人员的应用需求。
广泛的标准集合选项支持双向、四向和六向排序。试管架的尺寸从微型试管到12x75mm试管,再到15mL试管。
电子系统
BDInflux采用平行电子处理系统,能达到每秒200,000事件的分析速度,而且不受参数数量的限制。为了确保高灵敏度和低噪声,BDInflux在信号放大的第一阶段使用模拟电路。
模拟化峰值采集与保持电路的输出信号通过16位模数转换器被数字化,并传递至专利设计的平行处理数据总线上。总线处理实时补偿和其它数字化信号,包括多达8个附加脉冲的峰面积和宽度。
对于分选细胞,研究人员可以通过创建多达32个分选门来选择不同亚群。包括纯度、回收率或计数准确性优先的多种分选模式都是标准选项。
自定义模式允许研究人员根据特定应用优化系统参数设置。如果不注重纯度,理论上,分选速度可以与分析速度相匹配,从而可单独分选细胞并快速富集。然而,在大多数情况下,纯度是一个主要关注因素,例如液滴形成速率、上样速度和样品质量都对此起关键作用。在综合考虑这些因素后,回收率可以通过Poisson统计来计算。使用正确制备的样品,BDInflux系统可以达到>80%的Poisson预期回收率。
Accudrop技术简化了液滴延迟设置过程,避免了通常需要的手动计算。精确测定液滴延迟非常重要,因为它能确保仪器将电量精确加载到液滴上。在观察BDAccudrop微球的同时,可以调整液滴延迟,无需使用荧光显微镜或手动计算,研究人员可以获得准确的液滴延迟值。
适应性BD注入系统几乎适用于任何环境,并且由于占地面积小和模块化的设计,使得仪器能够适应狭小的空间和特定需求。由于其占地面积小和模块化设计,BD内流细胞分选机成为海洋生物应用的首选仪器。BDInfluxMariner版本包括用于微弱荧光微生物的前置放大器修改和用于固定船上安装的流体箱的支架。一系列标准检测模块可根据应用需求进行配置。可更换的探测器模块提供测量小颗粒、散射偏振状态或荧光信号的能力。
小颗粒选项允许BD内流系统改进前向散射检测。此选项使用特殊探测器降低尺寸测量的阈值。针孔减少了杂散光量,并防止PMT饱和。此外,优化的鞘液降低了固有的噪声水平,使测量颗粒小到200纳米。
计算机化细胞沉积装置允许分类到微量滴定板或其他定制设备,如载玻片或培养皿。通过索引排序,可以在多位置分类设备中检查每个细胞的完整流动表型。索引分拣模式创建一个FCS文件,其中包含每个事件的所有分拣沉积信息和托盘位置信息,以便追溯分选结果。
灵活的收藏格式电池沉积单元-大除了分拣成管外,BD流入分拣机还支持各种幻灯片、盘子和定制设备。软件BDFACSSortware分选软件提供对细胞分选仪的全面控制,从仪器设置到实验获取的补偿调节、分选和分析,以满足特定应用的需求。通过获取一个事件的所有信息,可满足研究人员用于质量控制或分选后分析的需求。软件采用工业标准协议,管理成百个系统参数,支持前沿研究应用。
多任务处理能力使研究人员能够同时进行细胞分类、保存数据并分析数据。软件向导和控制程序可协助单元分组分类、补偿操作、分选监控和结果分析。自动补偿向导可基于使用者所选择的对照群创建一个溢出矩阵,并自动计算补偿矩阵来调整分群。数据和分选分析工具提供可靠的细胞群统计和单个细胞水平的分选质量控制。为了支持分析,BDFACSSortware提供多种输出格式,如直方图、叠加直方图、散点图、密度图和等高线图,同时支持线性、对数和双指数(Logicle)等比例选择。另外,研究人员可以将图形数据和文本导入常用工作软件(如Microsoft®Office®)以供演讲或发表。此外,结果也可以以FCS数据文件的形式输出和导入至其他应用软件进行直观的工作流程。BDFACSSortware具有简单直观的工作流程,采用熟悉的Microsoft®Windows®界面,使研究人员能够更专注于实验而非操作命令和对话框。研究人员可以逐步执行细胞仪设置、补偿、数据获取、设置门、分析和分选,同时可以随时返回之前的任何步骤进行即时调整。







