分析 1、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因–DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA–分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质–抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
2、分析题图:图示是基因工程的基本操作流程,其中A为运载体;①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导人受体细胞,④目的基因的检测与鉴定.
解答 解:(1)分析图解,基因工程中需要将目的基因和运载体构建成重组质粒,因此图中A是运载体;在基因工程中,需要在限制酶的作用下才能完成剪切过程;过程②需要DNA连接酶,该酶拼接的是磷酸二酯键.
(2)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是纤维注射法;将目的基因导入双子叶植物最有效的方法是农杆菌转化法.
(3)检测目的基因是否导入受体细胞,常用DNA分子杂交技术.
故答案为:
(1)运载体 限制性核酸内切酶 磷酸二酯键
(2)显微注射技术 农杆菌转化法
(3)DNA分子杂交
点评 本题结合基因工程的基本操作流程图,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用;明确目的基因可以在受体细胞中得到表达的生理基础.








