2026-05-06 12:13:37 分类:新闻
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血小板(Platelet,PLT)是由骨髓造血组织中的巨核细胞产生的,它具有维持血管内皮完整性以及黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等功能,在止、凝血过程中具有重要作用。血小板计数是止血、凝血检查最常用的筛检试验之一。一般血小板计数低于 50*109/L 报危急值;低于 20*109/L,可有较严重的出血,考虑预防性输注血小板;低于 5*109/L 可导致严重出血。因此准确的血小板计数对于临床决策尤其重要。
一、临床实验室主要利用全自动血细胞分析仪来检测PLT
全自动血细胞分析仪具有重复性好、方便、速度快、能同时提供多项指标等优点,检测原理用电阻抗法根据血小板体积的大小来进行计数,血小板体积一般为 8-12 fl,大血小板可达到 30 fl 以上,而红细胞体积一般为 80-100 fl,小红细胞可达到 50 fl,因此血小板计数容易受大血小板及聚集血小板的影响而假性减低,受红细胞碎片及小红细胞影响假性升高。
电阻抗法血小板计数用 PLT-I 表示。目前还有部分比较高端的血分析仪有专门的通道用荧光染色的方法对血小板的 RNA 物质进行染色来计数血小板数量,例如迈瑞 BC6800 及 BC6900 的网织红通道就可实现,其血小板数量计为 PLT-O。
血细胞计数需要用全血,因此血液离体后通常需要使用抗凝剂,去除或抑制某种凝血因子的活性以防止血液凝固。乙二胺四乙酸盐(EDTA)对细胞形态影响最小,是血细胞计数最常用的抗凝剂,但近年发现有 EDTA 依赖的血小板聚集现象导致血小板假性减低,而更换抗凝剂例如枸橼酸钠可以改善血小板聚集,达到准确计数的目的。
日常工作中怎样根据仪器提供的直方图及仪器报警判断血小板数值是否准确?怎样寻找原因并且利用仪器的 PLT-O 给出一个相对准确的结果?下面笔者就近日遇到的两例假性血小板减低的病例进行分析并提出解决方案。
数据结果:
①迈瑞 6900 PLT-I 数值为 73,直方图界标处未触底且有拖尾现象,怀疑有巨大血小板干扰或者血小板聚集现象,PLT-O 数值为 180,如图 1 所示。
图 1:血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图(PLT-I 与 PLT-O)
涂片镜检发现血小板有轻微聚集现象,如图 2 所示。
②采用 37℃水浴 30 分钟后重新上机检测,如图 3 所示,PLT-I 数值为 167,直方图完全正常。

图 3:血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图(PLT-I)
问题分析:迈瑞 6900 的 PLT-I 采用浮动界标,一定程度上可以解决小红细胞对血小板计数的影响,但是对于图 1 所示情况,血小板直方图右侧拖尾、不整但没有翘尾现象,界标处未触底,结合红细胞参数排除小红细胞影响,初步判断为血小板聚集或者大血小板影响。结合图片染色镜检,判断为血小板聚集。
解决方案:网织红通道的 PLT-O 运用了加温、震荡及解聚剂三管齐下可以解决血小板轻微聚集现象。本例 PLT-O 与水浴后的 PLT-I 及镜检结果相符。
①患者血小板 PLT-I 数值为 91,血小板直方图(图 4)右侧拖尾,涂片镜检发现血小板聚集,PLT-O 数值为 120,依经验评估 PLT-O 结果仍与镜检不符,拟定重新采血复查。
图 4:血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图(PLT-I)
②重新采血后,立即检测,结果如图 5 所示,采用 EDTA 抗凝剂的 PLT-I 数值为 233,采用枸橼酸钠抗凝剂的 PLT-I 数值为 196。
图 5:采用不同抗凝剂的血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图
图 6 是分别采用不同抗凝剂采血后立即上机的 PLT-O 结果。采用 EDTA 抗凝剂的 PLT-O 数值为 214,采用枸橼酸钠抗凝剂的 PLT-O 数值为 175。
图 6:采用不同抗凝剂的血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图
可以看出以上四个结果差别不大,镜下只有血小板的轻度聚集,如图 7 所示。(从开始上机到推片大概有 5 分钟的时间差)
③37℃ 水浴 30 分钟后上机重新检测 EDTA 抗凝血 PLT-I 数值只有 71,枸橼酸钠抗凝血 PLT-I 数值为 91。可以看到单纯加温远远不能将聚集的血小板解聚。

图 8:采用不同抗凝剂的血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图
而分别采用 EDTA 和枸橼酸钠抗凝剂的 PLT-O 结果数值分别为 228 和 158。见图 9 所示。
图 9:采用不同抗凝剂的血细胞分析仪迈瑞 6900 结果截图
目前为止,CDR 通道仍然表现优秀,这时可以看到镜下血小板已经是较严重聚集,如图 10。

④继续放置至 60 分钟,EDTA 和枸橼酸钠两种抗凝剂的 PLT-I 数值分别为 30、67,PLT-O 数值为 54 和 109,镜下血小板聚集进一步加剧(图 11)
图 11:涂片镜检结果截图

问题分析:当血小板聚集成簇时体积大于 30 fl,阻抗法会误认为是小红细胞而引起血小板计数假性偏低,迈瑞 6900 荧光法光学血小板可以在很大程度上解决血小板聚集的问题。
对于怀疑血小板聚集引起的假性减低,排除抽血原因后可以放至 37℃水浴 30 分钟检测,如不能解决,可以重新同时采集 EDTA 抗凝血及枸橼酸钠抗凝血,尽快(30 分钟内)使用 CDR 通道检测,因为随着时间的延长,血小板聚集加剧,要想解聚越来越困难,即使 BC6900 的网织红通道三管齐下也爱莫能助。
解决方案:本文中病例二其实是对于 EDTA 及枸橼酸钠都依赖的血小板聚集,这种情况比较少见,大部分 EDTA 依赖的血小板聚集用枸橼酸钠是可以解决问题的。有专家认为可以用肝素抗凝血来计数血小板,病例二中考虑到患者依从性的问题,我们没有再对患者抽血。如果遇到静脉采血困难者例如婴幼儿及儿童可以采集末梢血,不加任何抗凝剂,使用末梢血的预稀释模式检测。
另外,世界卫生组织推荐显微镜手工计数为 PLT 的参考方法,王剑飚教授推荐血涂片体尾交界处观察 10 ~ 15 个视野,用公式(镜下血小板 / 镜下红细胞)* 仪器红细胞来估计血小板数。因此,审核结果时要与显微镜检结果结合再发出报告。
有资料显示 PLT-O 不仅可以解聚血小板聚集,对于小红细胞、红细胞碎片干扰血小板计数也有纠正作用,本文未涉及相关病例。但是无论哪种原因造成的干扰都可以用涂片镜检来分析原因、辅助判断,再进一步完成血小板的准确计数,因此血涂片镜检的作用不可忽视。
1. 王建中,屈臣雪。三种流式细胞术计数血小板方法的比较研究 [J]. 中华检验医学杂志,2003,26(1):8-12
2.Briggs C,Harrison P,Machin SJ. Continuing developments with the automated platelet count[J].Int J Lab Hematol,2007,29(2):77-91.